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链霉素ELISA检测试剂盒-美正生物

时间:2022-7-7 16:56:01来源:本站原创作者:佚名点击:


检测项目:兽药残留



适用样本:乳品、蜂蜜



概述



#链霉素ELISA检测试剂盒采用间接竞争#ELISA#方法,在酶标板微孔上预包被链霉素抗原,样本中链霉素和此抗原竞争链霉素抗体(抗试剂),加入酶标二抗(酶标物)与链霉素抗体相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与链霉素含量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中链霉素的含量。



适用范围



可定性、定量检测乳品、蜂蜜样中链霉素的含量。


检测步骤


1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25°C)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。



2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷冻。



3、洗涤液在使用前也需回温。



4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。



5、加标准品/样本:加入标准品或样本100μL到对应的微孔中,再加入链霉素酶标物50μL/孔,再加入链霉素抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应30min。



6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液250μL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,在吸水纸上拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。



7、显色:加入底物液A液50μL/孔,再加入底物液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应15min。



8、测定:加入终止液50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。



结果判定



请利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析(欢迎来电索取)。


注意事项

1、室温低于20°C或试剂及样本没有回到室温(20~25°C)会导致所有标准的OD值偏低。2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3、每加一种试剂前需将其摇匀。4、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、储存条件保存试剂盒于2~8°C,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20min,但不得超过20min。反之,则减短反应时间。9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象,请加热溶解后使用。10、该试剂盒最佳反应温度为25°C,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

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